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定氮儀蒸餾器簡(jiǎn)稱蒸餾器,是一種專門用來(lái)蒸餾、有時(shí)也可以用來(lái)滴定的設(shè)備。它可以單獨(dú)使用,用來(lái)對(duì)樣品進(jìn)行蒸餾,或者跟消化爐一起使用,結(jié)合成定氮儀,更加方便來(lái)用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)的氮含量。
一般凱式定氮法測(cè)定樣品中蛋白質(zhì)含量可以分為以下步驟:消化、蒸餾、吸收、滴定四步。消化樣品需要用到消化爐,其中上海旌派儀器有限公司的出產(chǎn)的消化爐有好多種不同的型號(hào),如有4孔、8孔、12孔的,也有經(jīng)濟(jì)型消化爐和數(shù)顯型消化爐。蒸餾則是運(yùn)用定氮儀蒸餾器進(jìn)行蒸餾。蒸餾是滴定的前提,只有將樣品中的含氮物質(zhì)*蒸餾出來(lái),才能進(jìn)行滴定,如果蒸餾器沒(méi)有將含有含的化學(xué)物質(zhì)*蒸餾吸收,那么測(cè)出的蛋白質(zhì)結(jié)果將有偏差。滴定即用相應(yīng)的試劑對(duì)樣品中吸收出來(lái)的含氮物質(zhì)進(jìn)行滴定。下面我們具體看下用凱式定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的蒸餾過(guò)程。
首先要對(duì)蒸餾器進(jìn)行洗滌:用水洗滌干凈定氮儀蒸餾器,在蒸汽發(fā)生器中加入用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑,用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鐘后,在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶,繼續(xù)蒸汽洗滌2分鐘,觀察錐形瓶?jī)?nèi)的溶液是否變色,如不變色則證明蒸餾裝置內(nèi)部已洗滌干凈。移走錐形瓶,停止加熱,打開夾子。
蒸餾器蒸餾過(guò)程:取下棒狀玻塞,用吸管吸取消化液,細(xì)心地插到反應(yīng)室小玻璃杯的下方,塞緊棒狀玻塞。將一個(gè)含有硼酸和指示劑的錐形瓶放在冷凝器下方,使冷凝器下端浸沒(méi)在液體內(nèi)。取30%的氫氧化鈉溶液10ml放入小玻璃杯中,輕提棒狀玻璃塞使之流入反應(yīng)室(為了防止冷凝管倒吸,液體流入反應(yīng)室必須緩慢)。尚未*流入時(shí),將玻璃塞蓋緊,向玻璃杯中加入蒸餾水約5ml。再輕提玻璃塞,使一半蒸餾水慢慢流入反應(yīng)室,一半留在玻璃杯中作水封。加熱水蒸汽發(fā)生器,沸騰后夾緊夾子,開始蒸餾。氨氣進(jìn)入錐形瓶,瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。變色時(shí)起記時(shí),再蒸餾5分鐘。移動(dòng)錐形瓶,使硼酸液面離開冷凝管約1厘米,并用少量蒸餾水洗滌冷凝管口外面,繼續(xù)蒸餾1分鐘,移開錐形瓶,用表面皿覆蓋錐形瓶。蒸餾完畢后,須將反應(yīng)室洗滌干凈,再繼續(xù)下一個(gè)蒸餾操作。待樣品和對(duì)照均蒸餾完畢后,同時(shí)進(jìn)行滴定。